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T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)商品屬性:
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T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)
200U
BJ-PJ6711
T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)
2000U
BJ-PJ6711
商品介紹:描述:T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)能夠催化 ATP 的 γ-位磷酸基團轉移到寡核苷酸鏈(雙鏈或單鏈 DNA 或 RNA)的 5’-羥基末端以及 3’-單磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶還具有3’磷酸酶活性,將3’磷酸基團從寡核苷酸的 3’磷酸末端、脫氧 3’-單磷酸核苷和脫氧 3’-二磷酸核苷上水解掉。該酶經后,其 3’磷酸酶活性缺失,但仍保留了所有激酶的活性。
儲存:-20℃ 可保存 2 年。
活性定義:
1Unit 指 37℃條件下,30 分鐘內催化 1nmol 酸不溶性[32P] 摻入所需要的酶量。
注意:
(1)1×T4 PNK Buffer:70 mM Tris-HCl pH 7.6,10 mMMgCl2,5 mM DTT。
(2)熱失活:65°C 加熱 20 分鐘。
(3)一般來說,進行激酶反應之后是連接反應。在這種情況下,T4 多聚核苷酸激酶反應在連接酶反應緩沖液中 37°C溫育 30 分鐘即可。反應后的產物可直接進行連接,無需改變緩沖液和進行熱失活。如果連接時需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化狀態,則需要在連接反應前熱失活 T4 多聚核苷酸激酶。
\???????注意:1 pmol 的 5’末端 DNA,相當于 1 μg 的 PCR 產物(3kb 大小)。
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