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Strep-Tactin XT Resin商品屬性:
產品名稱
規格
貨號
Strep-Tactin XT Resin
5ml
BJ-PJ6659
商品介紹:描述:
Strep-Tactin XT(Strep-Tactin 的升級產品)瓊脂糖凝膠 FF 是一種將 Strep-Tactin XT 共價交聯在瓊脂糖凝膠微球上,形成的生物親和層析分離介質。該純化介質主要用于純化 Strep tag II 或 Twin strep tag 標簽蛋白。Strep tagII 標簽為 8 個氨基酸的小標簽(WSHPQFEK),由于標簽小,僅為 1kDa 左右,一般不影響融合后蛋白質的結構和功能,常用于融合表達蛋白質的檢測和純化。由于 Strep-Tacin XT 對 Strep tag II 標簽具有高度特異性,一步純化就能獲得高純度的蛋白質樣品。Strep tag II 標簽蛋白與凝膠結合后可使用脫硫生物素競爭方式進行洗脫,該洗脫方式比較溫和,對蛋白影響極小。由于 Strep-Tactin 對 Strep tag II 標簽具有很強的吸附能力,在生物素的洗脫過程中不易完全洗脫,造成洗脫效率較低。可以通過在脫硫生物素洗脫液中添加 25mM NaOH 來提高蛋白回收效率,而添加 NaOH 后會造成 Strep-Tactin從填料上脫落,進而污染純化蛋白。本產品為升級的 Strep-Tactin XT,其可耐受高濃度的 NaOH 洗脫(0.5M),除此外 Strep-Tactin XT 可耐受 1%SDS、6M 尿素,因此使用該填料可以在變性條件下純化標簽蛋白。
儲存:4~8℃可保存 2 年。
保存液:10mM Tris-HCl,pH7.5;100mM NaCl;20%乙醇
實驗用溶液:
(1) 結合緩沖液:根據自身蛋白性質來定,一般推薦 50mM Tris-HCl(pH8.0), 150mM NaCl(或采用 PBS)
(2) 洗滌液與結合緩沖液相同,一般洗滌 5~20 個柱體積。
(3) 洗脫緩沖液:在結合緩沖液中加入 2.5~3.5mM D-Biotin。或根據蛋白性質和用途靈活使用其它洗脫條件,如 2.5mMD-Biotin+10mM NaOH;25~50mM NaOH;0.2% SDS:
(4) 柱再生:0.2M NaOH 洗滌 3~5 個柱體積;1M NaCl 洗滌 3~5 個柱體積;PBS 平衡 3~5 個柱體積。