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鏈霉親和素磁珠
鏈霉親和素磁珠
商品描述:
商品屬性
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鏈霉親和素磁珠商品屬性:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
鏈霉親和素磁珠
1ml(10mg/ml)
BJ-PJ6380
商品介紹:鏈霉親和素磁珠是一種高度均勻的超順磁性微球,表面包覆著高密度的超純鏈霉親和素(>97%)。微球經(jīng)過專門設(shè)計、測試和質(zhì)量控制,可用于免疫沉淀、細(xì)胞分選、快速單步捕獲生物素化分子,如 DNA、RNA、抗體或細(xì)胞裂解物或雜交反應(yīng)中的蛋白質(zhì)等。鏈霉親和素(或抗生素多倍體)和生物素之間的相互作用表現(xiàn)出已知的最高非共價相互作用之一。抗生物素、鏈霉親和素、單體抗生物素及其類似物已成為探針和親和配體的有力工具,在生化分析、診斷、親和純化和藥物傳遞等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。鏈霉親和素是一種四聚體生物素結(jié)合蛋白,源于鏈霉菌親和素 II,質(zhì)量為 60000 道爾頓。鏈霉親和素不含碳水化合物,pI 較低,非特異性結(jié)合程度較低,使鏈霉親和素成為許多檢測系統(tǒng)的理想試劑選擇。
產(chǎn)品特點: 使用鏈霉親和素-生物素結(jié)合系統(tǒng)的優(yōu)點和益處:
·極高的親和力:鏈霉親和素是同源四聚體,具有較高的生物素結(jié)合親和力,具有KD~10−14 米。
·高穩(wěn)定性:生物素結(jié)合復(fù)合物具有優(yōu)異的穩(wěn)定性,可抵抗極端 pH、溫度(2°C 和40°C)、苛刻的有機溶劑、變性劑(如氯化胍)、洗滌劑(如 SDS)和蛋白水解酶。
·突出的選擇性和特異性:生物素和鏈霉親和素的相互作用具有高度的特異性,確保了較低的非特異性結(jié)合。
·高靈敏度:高穩(wěn)定性和特異性確保了高檢測靈敏度。
·非常靈活:生物素的小尺寸和顯著穩(wěn)定性被證明非常適合相對容易地并入各種分子,例如合成聚合物、熒光團、小分子或生物分子中的特定位置,從而對共軛生物分子的結(jié)構(gòu)和功能施加最小的擾動。
鏈霉親和素磁性微球的優(yōu)點:·快速、簡單且一步到位的高通量程序:消除了柱狀物或過濾器,或重復(fù)費力的移液或 離心(圖 1) ·高結(jié)合能力 ·表現(xiàn)出較低的非特異性結(jié)合 ·可擴展-可輕松調(diào)整樣本大小和自動化
產(chǎn)品屬性:
所需材料 ·
Binding Buffer: 1x PBS, 0.1% BSA, pH 7.4 ·磁力分離器(適用于手動操作): 根據(jù)實驗時生物樣品的體積,使用者可以選擇以下不同型號的磁力分離器: 8孔磁力架 可以容納8個單獨的1.5-2.0 ml 離心管 ; 24孔磁力架可以容納24個單獨的1.5-2.0 ml離心管; 4孔磁力-15可以容納 4個單獨的15ml離心管; 4孔磁力架-50可以容納四個單獨的50 ml離心 管。操作過程:
注: · 該方案是一種通用親和純化程序。為了獲得最佳結(jié)果,每個用戶應(yīng)確定純化單個目標(biāo)蛋白的最佳工作條件。
·根據(jù)粗樣品中目標(biāo)生物素化分子的數(shù)量(基于珠子結(jié)合能力),優(yōu)化每種應(yīng)用中使用的珠子數(shù)量。使用過多的磁珠會導(dǎo)致背景較高,而使用過少的磁珠會導(dǎo)致產(chǎn)量較低。
1. 將最佳量的珠子轉(zhuǎn)移到離心管中。將管放在磁力架上1-3分鐘。在管留在分離器上的同時去除上清液。
2. 取下試管,用5倍體積的 1x Binding/Washing Buffer通過渦流清洗珠子30秒。將試管置于室溫下1-3分鐘。將管放在磁力架上1-3分鐘。在管留在分離器上的同時去除上清液。
3. 重復(fù)步驟二兩次。
向含有目標(biāo)分子的粗樣品中加入洗滌過的珠子,并在室溫或所需溫度下培養(yǎng)1-2小時(溫度越低,培養(yǎng)時間越長)。
注: 強烈建議進(jìn)行滴定以優(yōu)化培養(yǎng)時間。更長時間的孵育可能導(dǎo)致更高的背景。
4. 如步驟 2 所述清洗磁珠,直到 280 nm 處洗脫液的吸光度接近背景水平(OD280<0.05)。
注: 添加更高濃度的鹽、非離子洗滌劑和還原劑可降低非特異性背景。例如,向洗滌緩沖液中添加NaCl(高達(dá)1-1.5 M)、0.1-0.5%的非離子洗滌劑,如Triton X 100或吐溫20。