單體親和素磁珠

商品屬性：

產品名稱	規格	貨號
單體親和素磁珠	1ml（10mg/ml）	BJ-PJ6379

商品介紹：

產品介紹：
親和素（或鏈霉親和素）和生物素之間表現的相互作用，是已知的非共價相互作用最高的一種。親和素、鏈霉親和素、 單體親和素及其類似物已成為探針研究實驗中強大的親和配體工具，被廣泛應用于生化分析、診斷、親和純化和藥物遞送。Monomer Avidin Magnetic Beads是一種高度均勻的超順磁性微球，表面包裹著高密度的超純（>97%）亞單位單體親和素。單體親和素源自天然四聚體蛋白，它保留了與天然親和素相同的生物素結合特異性，但其生物素結合親和力會有顯著降低（kD=~10-8 M）。因此，通過使用溫和的洗脫條件，例如含有2 mM 生物素的緩沖液，就可以很容易地從單體親和素中洗脫結合的生物素化分子。本款磁珠經過專門設計、測試和質量控制，可用于免疫沉淀、細胞分選，以及從細胞裂 解液或雜交反應中快速一步捕獲生物素化分子，如DNA、RNA、抗體或蛋白質。

產品特點：
·快捷，簡單的一步法高通量操作;無需純化柱或過濾器，或重復移液、離心等操作
（圖1）
·極高的結合能力，在溫和的條件下洗脫結合的生物素化分子
·在溫和的洗脫條件下純化生物素化樣品
·極小的非特異性結合
·對樣本體積要求低，便于自動化操作
·成本低：只有市場同類產品磁珠價格的一半
·磁珠至少可以重復使用5次
緩沖液

·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸鈉, 0.15 M 氯化鈉; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS)
磁力分離器（適用于手動操作）：根據實驗時生物樣品的體積，使用者可以選擇以下不同型號的磁力分離器： 8 孔磁力架可以容納 8 個單獨的 1.5-2.0 ml 離心管 ; 24
孔磁力架可以容納 24 個單獨的 1.5-2.0 ml 離心管; 4 孔磁力-15 可以容納 4 個單獨的15ml 離心管; 4 孔磁力架-50 可以容納四個單獨的 50 ml 離心管。
操作過程
操作過程中實驗體積可根據需要放大或者縮小
提示：在純化生物素化蛋白質、多肽和其他分子之前。用戶應將試劑盒中的所有試劑溫度 平衡至室溫，并用雙蒸餾水配制 1x 工作溶液。
1. 輕輕震動裝有磁珠的試劑瓶，直到磁珠完全懸浮。將 50µl 磁珠轉移到新試管中。
提示：客戶應根據每個實驗粗樣品中生物素化分子的數量，根據經驗確定最佳的磁珠
使用量。過多的磁珠會導致背景更高；磁珠使用量少會造成產量降低。我們建議純化50μg 生物素化分子添加 50μl 完全懸浮的磁珠。
2. 將試管放在磁力分離器上1 分鐘。當磁珠完全沉淀時，去除上清液。取下試管加入四倍 磁珠體積的d2H2O，充分混合。并將試管再次置于磁力分離器上1 分鐘，完全去除上清 液。
3. 按照步驟2 所述方式，用四倍磁珠體積的1x PBS 緩沖液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠體積的1xBlocking / Elution Buffer，通過渦旋充分混合，并在室溫下培養5 分鐘。將試管放在磁力分離器上1 分鐘。完全去除上清液。
5. 加入六倍磁珠體積的1xRegenerationBuffer，通過渦漩充分混合，并將試管放在磁力分離 器上1 分鐘。完全去除上清液。
6. 加入四倍磁珠體積的1x PBS Buffer，并按照步驟2 所述方式清洗磁珠。這些磁珠可以隨時使用。
提示：必須立即使用磁珠，否則粘合能力將顯著降低。
7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的樣品，通過移液器吹吸充分混合，并在室溫下緩慢旋轉培養30-60 分鐘。
8. 將試管放在磁力分離器上，保持試管留在分離器上的同時去除上清液。如步驟 2 所示， 用1x PBS 清洗磁珠，直到在280 nm 處洗脫液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。
9. 加入一倍磁珠體積的Blocking/Elution Buffer，通過移液器吹吸充分混合，并在室溫下培養 5-10 分鐘，將與磁珠結合的生物素化分子洗脫下來。